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我們在使用細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時細(xì)胞生長狀態(tài)受各種因素的影響，這些因素看似不起眼，若不注意就會導(dǎo)致細(xì)胞負(fù)傷慘重。那么，在使用細(xì)胞工廠時的小細(xì)節(jié)究竟如何影響細(xì)胞生長，在使用細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時我們又該如何避坑呢？

1.細(xì)胞之間的接觸程度

正常細(xì)胞（二倍體）存在貼壁接觸抑制，長滿后細(xì)胞生長停止，而腫瘤細(xì)胞等非正常細(xì)胞，接觸抑制作用較弱，可生長至較高的細(xì)胞密度，但某些細(xì)胞過度生長，其損傷難以逆轉(zhuǎn)，所以培養(yǎng)細(xì)胞時不建議細(xì)胞密度太高。

劃重點：一般使用細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞細(xì)胞匯合度達(dá)到70-80%即可傳代，切忌長得太滿。

2.細(xì)胞生長附著物

貼壁細(xì)胞在正常情況下都會貼壁，但一些細(xì)胞本身貼壁不牢或貼壁性差，這個時候包被附著物能夠促進(jìn)細(xì)胞的黏附，所以在培養(yǎng)一些特殊細(xì)胞時，需要對細(xì)胞工廠進(jìn)行包被后使用。常用的基質(zhì)有多聚賴氨酸（D型、L型）、明膠、膠原蛋白、細(xì)胞外基質(zhì)混合物，培養(yǎng)時可根據(jù)需要自行選擇。

劃重點：細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞貼壁差時可使用基質(zhì)包被細(xì)胞工廠。

3.培養(yǎng)基的pH值

大多數(shù)細(xì)胞系在細(xì)胞工廠培養(yǎng)時在pH7.4左右時生長最好，而常規(guī)培養(yǎng)基的指示劑為酚紅，所以多數(shù)情況下，我們所見的培養(yǎng)基都呈紅色，但不同培養(yǎng)基的顏色會有差異，例如DMEM比1640顏色深一點。在培養(yǎng)細(xì)胞時，也可以根據(jù)細(xì)胞工廠內(nèi)培養(yǎng)基的顏色判斷細(xì)胞狀態(tài)，如隨著細(xì)胞生長，培養(yǎng)基顏色會變淺變黃。

劃重點：培養(yǎng)細(xì)胞時關(guān)注培養(yǎng)基顏色變化，發(fā)現(xiàn)異常及時處理。