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我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)過程中經(jīng)常會(huì)使用凍存管進(jìn)行細(xì)胞凍存，以此來保存細(xì)胞和減少細(xì)胞活力，當(dāng)我們重新使用凍存細(xì)胞的時(shí)候就需要進(jìn)行復(fù)蘇而在實(shí)際操作中，凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。

我們?cè)趶?fù)蘇的大概流程為：佩戴好實(shí)驗(yàn)物品如眼鏡、手套等，從低溫液氮罐中取出需要復(fù)蘇的凍存管。迅速放入38℃水浴中，并不時(shí)搖動(dòng)，在1分鐘內(nèi)使其完全融化，然后在無菌下取出細(xì)胞。然后進(jìn)行離心之后棄去上層液，在接種在細(xì)胞培養(yǎng)瓶或者其他耗材中。在進(jìn)行觀察，來調(diào)整。之后就可以正常培養(yǎng)細(xì)胞。

需要注意的是細(xì)胞復(fù)蘇操作時(shí)，應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快，可不時(shí)搖動(dòng)安瓿或冷凍管，使之盡快通過最易受損的溫度段（-5～0℃）。這樣復(fù)蘇的凍存細(xì)胞存活率高，生長(zhǎng)及形態(tài)良好。然而，由于凍存的細(xì)胞還受其他因素的影響，有時(shí)也會(huì)有部分細(xì)胞死亡。此時(shí)，可將不貼壁、飄浮在培養(yǎng)液上（已死亡）的細(xì)胞輕輕倒掉，再補(bǔ)以適量的新培養(yǎng)液，也會(huì)獲得較為滿意的結(jié)果。