俗話說(shuō)“知己知彼百戰(zhàn)不殆”,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中我們經(jīng)常會(huì)遇到各種各樣的污染,真菌污染就是常見的一種。那么,我們?cè)撊绾巫R(shí)別細(xì)胞工廠中的真菌污染呢?發(fā)現(xiàn)真菌污染后又該如何應(yīng)對(duì)呢?
真菌污染非常常見,污染細(xì)胞的對(duì)位煙曲霉、黑曲霉、毛霉菌、白念珠菌、酵母菌、孢子霉等。細(xì)胞受到真菌污染后會(huì)在培養(yǎng)液中形成白色或者淺黃色漂浮物。一般肉眼可見,較易被發(fā)現(xiàn),短期內(nèi)培養(yǎng)液多不混濁,倒置顯微鏡下可見于細(xì)胞之間縱橫交錯(cuò)穿行的絲狀、管狀、及樹枝狀菌絲,并懸浮飄蕩在培養(yǎng)液中。
很多菌絲在高倍鏡可見到有鏈狀排列的菌珠;念珠菌或酵母菌形態(tài)呈卵形,散在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間生長(zhǎng)。鏡下看時(shí),要將細(xì)胞工廠用酒精棉球擦干凈,以防止與外部生長(zhǎng)的菌絲相混淆。真菌污染后,細(xì)胞生長(zhǎng)變慢,但最后由于營(yíng)養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。
由于真菌和細(xì)胞的生理特性類似,通常不在培養(yǎng)基中添加相應(yīng)的抗生素進(jìn)行預(yù)防。細(xì)胞一旦發(fā)現(xiàn)被真菌污染,應(yīng)立即查找污染源,進(jìn)行清理消毒。在無(wú)法控制的時(shí)候,需對(duì)整個(gè)培養(yǎng)室進(jìn)行全面消毒。
總的來(lái)說(shuō),真菌生長(zhǎng)比較慢,不如細(xì)菌容易被發(fā)現(xiàn),一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞工廠中的細(xì)胞感染真菌,基本就比較嚴(yán)重了,細(xì)胞很難救活。所以平時(shí)我們要以預(yù)防為主,嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。