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我們在使用細(xì)胞搖瓶來培養(yǎng)細(xì)胞時總會遇到各種各樣的問題，富道細(xì)胞今天跟大家分享一下我們在使用細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)細(xì)胞時的注意事項(xiàng)。

懸浮細(xì)胞常規(guī)推薦接種密度：3-5×105cell/mL，生長到2×106cell/mL左右可繼續(xù)傳代；該密度建議為理論值，實(shí)際按照每個細(xì)胞特性有波動；培養(yǎng)懸浮細(xì)胞需要穩(wěn)定的生長環(huán)境，少操作，少觀察，更有利于細(xì)胞生長；

不建議將聚團(tuán)的細(xì)胞頻繁吹散，等待密度高和狀態(tài)改善時，細(xì)胞會自行散開；部分細(xì)胞聚團(tuán)生長為特性，吹散不利于生長，請注意查看相關(guān)培養(yǎng)說明；有些細(xì)胞本身就是聚團(tuán)生長(NK92,NK92MI,JURKAT,H209,ATT20等)，有些細(xì)胞本身就形態(tài)不圓（H9等），為正常現(xiàn)象，無需特殊處理；

豎瓶培養(yǎng)可以促進(jìn)細(xì)胞生長，但由于拿出來觀察時都是橫瓶，觀察久了細(xì)胞會貼到底部，觀察完再次豎起來就會有細(xì)胞掛在瓶底部，而細(xì)胞沒有培養(yǎng)基滋潤很快就會死掉并殘留在壁上，從而導(dǎo)致養(yǎng)著養(yǎng)著細(xì)胞越來越少，貼壁細(xì)胞越來越多；因此，在培養(yǎng)瓶豎置操作時需注意吹下細(xì)胞搖瓶底部的細(xì)胞，避免細(xì)胞殘留。