細胞工廠適用于大規(guī)格工業(yè)批量生產(chǎn),主要培養(yǎng)細胞也為貼壁培養(yǎng),其培養(yǎng)細胞為甲肝疫苗、乙肝疫苗、水痘疫苗等主要生產(chǎn)途徑,但是我們在使用細胞工廠培養(yǎng)細胞時經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)細胞工廠內(nèi)細胞不貼壁,那我們應該怎么做呢?
首先,細胞工廠培養(yǎng)細胞時如果出現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象,其原因是多方面的,具體可以從以下幾個方面分析解決:
胰蛋白酶消化過度:胰蛋白酶是幫助細胞進行消化的,如果消化過度會對細胞的活性將產(chǎn)生較大的損傷,并有細胞漂浮。可以通過縮短消化時間或降低胰蛋白酶濃度的辦法進行控制。
支原體污染:細胞對環(huán)境比較敏感,如果操作人員不注意衛(wèi)生、或工作環(huán)境及實驗器材出現(xiàn)污染都會導致細胞間的交叉污染,出現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象。如果發(fā)現(xiàn)支原體污染,及時丟棄培養(yǎng)物。
細胞老化:細胞老化(cellular aging)是細胞隨生物體年齡增長而發(fā)生退行性變化的總和,如果傳代前細胞已匯合就會導致其失去貼附性。可以復蘇新的保種細胞,重新進行培養(yǎng)。
此外,如果接種細胞時的起始濃度太低或太高也會影響細胞的貼壁性能,調(diào)節(jié)好合適的接種細胞濃度可以解決這一問題。在使用細胞工廠前,操作人員要做好自身及環(huán)境的消毒工作,避免因各種污染影響細胞培養(yǎng)進程。
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