細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境,使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞的生長(zhǎng)需要特定的條件,在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),需要哪些條件呢?
1.無(wú)菌環(huán)境
無(wú)毒和無(wú)菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件。在細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)細(xì)胞,缺乏機(jī)體免疫系統(tǒng)的保護(hù)而喪失對(duì)微生物的防御能力和對(duì)有害物質(zhì)的解毒能力,為保證細(xì)胞能在體外環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖,必須要確保無(wú)菌工作區(qū)域、良好的個(gè)人衛(wèi)生、無(wú)菌試劑和培養(yǎng)基以及無(wú)菌操作。
2.合適的溫度
一般哺乳類與禽類細(xì)胞在體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃,不適宜的環(huán)境溫度會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。
3.適宜的滲透壓
高滲溶液或低滲溶液會(huì)引起細(xì)胞發(fā)生褶皺、腫脹、破裂。因此,滲透壓是體外培養(yǎng)細(xì)胞的重要條件之一。多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)滲透壓都有一定的耐受能力,實(shí)際應(yīng)用中,260~320mmol/L的滲透壓可適用于大多數(shù)細(xì)胞。
4.氣體環(huán)境與pH
細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境,氧氣、二氧化碳是細(xì)胞生存的必要條件。氧氣參與細(xì)胞的三羧酸循環(huán),為細(xì)胞生存、代謝與合成提供能量;二氧化碳既是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需成分,又與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)。大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH范圍往往是7.2~7.4。在開(kāi)放式培養(yǎng)中,以5%的二氧化碳?xì)怏w比例為宜。
以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶中細(xì)胞生長(zhǎng)的四個(gè)條件,也是確保細(xì)胞良好生長(zhǎng)狀態(tài)的必要因素,我們?cè)诓僮鞯臅r(shí)候尤其要注意無(wú)菌操作,避免污染細(xì)胞。