細胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境,使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞的生長需要特定的條件,在細胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)細胞時,需要哪些條件呢?
1.無菌環(huán)境
無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要條件。在細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)細胞,缺乏機體免疫系統(tǒng)的保護而喪失對微生物的防御能力和對有害物質(zhì)的解毒能力,為保證細胞能在體外環(huán)境中生長繁殖,必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。
2.合適的溫度
一般哺乳類與禽類細胞在體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃,不適宜的環(huán)境溫度會影響細胞的生長。
3.適宜的滲透壓
高滲溶液或低滲溶液會引起細胞發(fā)生褶皺、腫脹、破裂。因此,滲透壓是體外培養(yǎng)細胞的重要條件之一。多數(shù)體外培養(yǎng)的細胞對滲透壓都有一定的耐受能力,實際應(yīng)用中,260~320mmol/L的滲透壓可適用于大多數(shù)細胞。
4.氣體環(huán)境與pH
細胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境,氧氣、二氧化碳是細胞生存的必要條件。氧氣參與細胞的三羧酸循環(huán),為細胞生存、代謝與合成提供能量;二氧化碳既是細胞的代謝產(chǎn)物,是細胞生長的必需成分,又與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)。大多數(shù)細胞適宜的pH范圍往往是7.2~7.4。在開放式培養(yǎng)中,以5%的二氧化碳氣體比例為宜。
以上是細胞培養(yǎng)瓶中細胞生長的四個條件,也是確保細胞良好生長狀態(tài)的必要因素,我們在操作的時候尤其要注意無菌操作,避免污染細胞。