細胞空泡化是指變性細胞的胞質、胞核內出現(xiàn)大小不一的空泡(水泡),細胞呈蜂窩狀或網狀的現(xiàn)象。出現(xiàn)這種情況的原因是多方面的,我們可以通過日常的操作,盡量少的降低細胞培養(yǎng)瓶內的細胞空泡化。
1.確認細胞狀態(tài):培養(yǎng)細胞前確定細胞狀態(tài),盡量選擇代數(shù)靠前的細胞進行培養(yǎng),避免培養(yǎng)過程中細胞因為老化而空泡。
2.確定培養(yǎng)液PH值:確認培養(yǎng)液 PH與細胞所需PH的適宜性,避免因為PH不合適影響細胞生長。
3.控制胰酶消化時間:在傳代時,要選用合適濃度的胰酶和選取適當?shù)南瘯r間進行消化,在操作時避免吹打太過用力出現(xiàn)太多氣泡。
4.隨時觀察細胞狀態(tài):培養(yǎng)細胞時,隨時觀察細胞培養(yǎng)瓶內的細胞狀態(tài),保證細胞所需營養(yǎng)充足,避免因為營養(yǎng)缺失導致細胞空泡化。
5.盡量使用質量好和渠道正規(guī)的胎牛血清,因為這樣的血清營養(yǎng)豐富且外源刺激因子少,可以有效的避免出現(xiàn)這類問題。
通過以上操作可以減少細胞培養(yǎng)瓶內的細胞空泡化,此外,在操作的時候要嚴格執(zhí)行無菌要求,減少各種污染的可能性,如果發(fā)現(xiàn)細胞受到污染,及時丟棄,避免對后續(xù)實驗產生影響。
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