細胞搖瓶是懸浮細胞培養(yǎng)專用的培養(yǎng)容器,也可以用來制備、混合、儲存各種培養(yǎng)基。在培養(yǎng)Jurkat細胞時,就用到了這種培養(yǎng)耗材。
Jurkat細胞株來源于一個14歲男孩的外周血,屬于懸浮細胞,細胞培養(yǎng)庫中已經(jīng)可以獲取缺少某些基因的Jurkat衍生細胞系。主要用于研究急性T細胞白血病,T細胞信號傳導(dǎo)以及易感病毒進入的各種趨化因子受體,特別是HIV的表達的永生化人T淋巴細胞系。它在生物學(xué)研究上具有十分廣泛的應(yīng)用,比如應(yīng)用Jurkat細胞研究核糖核酸酶P的M1-RNA,探討抗MHCⅡ類分子轉(zhuǎn)錄激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制細胞表面MHCⅡ類分子的表達。
在利用細胞搖瓶培養(yǎng)Jurkat細胞時,需要用到RPMI1640培養(yǎng)基,10% FBS; 溫度控制在37℃,5%的二氧化碳,PH值7.2-7.4,無菌恒溫培養(yǎng)。在移入細胞超凈臺前使用75%酒精擦拭消毒,從液氮罐中取出細胞凍存管,立即置于37℃水浴中并快速搖動細胞凍存管,使其快速的融化。然后再經(jīng)過離心、吹打混勻等操作后,置于細胞培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
細胞對環(huán)境特別敏感,在利用細胞搖瓶培養(yǎng)Jurkat細胞時要做好個人衛(wèi)生,選用無菌試劑,遵循無菌操作原則,避免引入細菌,影響細胞生長。
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