貼壁細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候,細(xì)胞不貼壁是令人非常頭疼的問題。而在懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)同樣有問題困擾科研人,那就是細(xì)胞成簇。如果細(xì)胞搖瓶中的細(xì)胞成簇是什么原因呢,我們又該怎么辦呢?
在懸浮細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞抱團(tuán)生長是常見的一種情況,其原因是多方面的,如換液離心后沒有重懸,也有可能是培養(yǎng)基中的血清問題、或者鈣鎂離子濃度的變化造成了細(xì)胞間的粘附力改變;蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解等。細(xì)胞結(jié)團(tuán)會阻礙細(xì)胞獲取關(guān)鍵的營養(yǎng)素,不利于其健康成長。
如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞搖瓶中的細(xì)胞成簇,我們可以用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,輕巧吹吸;細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液;分離培養(yǎng)物,檢測支原體;如果感覺有死細(xì)胞的 DNA,在細(xì)胞懸液中加入幾滴無菌的 DNAse(1mg/ml 溶于水)將 DNA 鏈打斷,輕柔地吹打細(xì)胞,防止對細(xì)胞膜造成物理損傷。
在細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)細(xì)胞的過程中,我們可能會遇到各種各樣的問題,細(xì)胞成簇僅僅是其中的一種。遇到問題后我們可以通過分析找到原因,制定相應(yīng)的解決方案,或吸取經(jīng)驗(yàn),在以后的實(shí)驗(yàn)中盡量避免這種情況。