1.我們在實(shí)驗開始時前一天,將培養(yǎng)基添加劑從-20°C冰箱中取出,置于4°C冰箱中直至完全溶解;
注意事項:
1)請勿將培養(yǎng)基添加劑從-20°C冰箱中取出后直接置于37°C中;
2)培養(yǎng)基添加劑溶解完全后輕輕搖晃血清瓶身,使其成份均一,搖晃時,請小心避免氣泡產(chǎn)生;
3)解凍時,若有蛋白沉淀產(chǎn)生屬于正?,F(xiàn)象,配制成完全培養(yǎng)基后會漸漸溶解,并繼續(xù)提供營養(yǎng)物質(zhì)。
2.在將血清瓶拿進(jìn)超凈臺之前,用75%酒精對其表面進(jìn)行消毒;
3.按比例將培養(yǎng)基添加劑加入到人間充質(zhì)干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基中;
注意:若每次使用的完全培養(yǎng)基的量較少,建議先將培養(yǎng)基添加劑溶解后分裝成小規(guī)格體積凍存,使用時,再以5%的添加量與基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合均勻即可。
4.吸取基礎(chǔ)培養(yǎng)基洗滌瓶身內(nèi)壁,并重復(fù)操作一次,盡可能使培養(yǎng)基添加劑全部加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中;
5.輕輕搖晃基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶身,使各成分混合均勻,搖晃時,請避免氣泡產(chǎn)生。將配制好的人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清完全培養(yǎng)基置于2-8°C保存。