在培養(yǎng)細胞的時候,細胞培養(yǎng)瓶是經常用到的一種容器,它采用寬瓶頸設計,方便實驗人員操作。細胞的生長需要特定的條件,其中無菌環(huán)境是非常重要的一點。
無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要條件。細胞在活體內,解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質的入侵,但細胞在細胞培養(yǎng)瓶等體外培養(yǎng)的過程中,缺乏機體免疫系統(tǒng)的保護而喪失對微生物的防御能力和對有害物質的解毒能力。為保證細胞能在體外環(huán)境中生長繁殖,必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。
常見的微生物污染有支原體、細菌、真菌。支原體無致死毒性,可與細胞長期共存,對細胞有潛在影響,但體積小,不易鑒別,可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來進行檢測。細菌增殖快,在短時間內即可大量擴增,并產生毒素殺死細胞。真菌的種類繁多,肉眼可見,漂浮于培養(yǎng)液面上,可呈絲狀、管狀或樹枝狀等。
當然,無菌環(huán)境僅僅是細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細胞的重要條件之一,其他還包括合適的溫度、滲透壓、氣體環(huán)境PH值等,這些都是細胞生長所需的基本條件。