今天富道細(xì)胞來(lái)跟大家介紹一下細(xì)胞工廠(chǎng)中細(xì)胞或真菌污染的影響及檢測(cè)。首先呢我們常見(jiàn)的污染細(xì)菌有大腸桿菌、假單孢菌、葡萄球菌等。細(xì)菌污染初期由于培養(yǎng)體系的抗生素作用,其繁殖處于抑制狀態(tài),細(xì)胞生長(zhǎng)不受明顯影響,污染情況用倒置顯微鏡觀(guān)察不易判斷。懷疑培養(yǎng)細(xì)胞有細(xì)菌污染時(shí),取10ml細(xì)胞懸液離心1000轉(zhuǎn)5分鐘,沉淀中加入無(wú)抗生素培養(yǎng)液2ml,將細(xì)胞放培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
如果培養(yǎng)無(wú)真的細(xì)菌污染,24小時(shí)內(nèi)可以獲得陽(yáng)性結(jié)果。當(dāng)污染的細(xì)菌量比較大或者細(xì)菌增殖到一定基數(shù)時(shí),大約每20分鐘一代,會(huì)使培養(yǎng)系統(tǒng)中很快產(chǎn) 生大量細(xì)菌,后者不僅可以消耗培養(yǎng)系統(tǒng)中的養(yǎng)分,還能釋放大量代謝產(chǎn)物。幾個(gè)小時(shí)后,增殖的細(xì)菌就可以導(dǎo)致培養(yǎng)液外觀(guān)渾濁,肉眼就可以判斷。細(xì)菌污染大多 數(shù)可以改變培養(yǎng)液pH,使培養(yǎng)液變渾濁、變色。用相差顯微鏡觀(guān)察,可見(jiàn)滿(mǎn)視野都是點(diǎn)狀的細(xì)菌顆粒,原來(lái)的清晰培養(yǎng)背景變得模糊,大量的細(xì)菌甚至可以覆蓋細(xì) 胞,對(duì)細(xì)胞的生存構(gòu)成威脅。用青霉素、鏈霉素可以預(yù)防細(xì)菌污染有效。
微生物污染中以真菌最多,真菌種類(lèi)繁多,形態(tài)各異,但是污染后易于發(fā)現(xiàn),大多呈白色或淺黃色小點(diǎn)漂浮于培養(yǎng)液表面,肉眼可見(jiàn);有的散在生長(zhǎng),鏡下可 見(jiàn)呈絲狀、管狀、樹(shù)枝狀,縱橫交錯(cuò)穿行于細(xì)胞之間。念珠菌和酵母菌卵圓形,散在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間生長(zhǎng)。真菌生長(zhǎng)迅速,能在短時(shí)間內(nèi)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、產(chǎn)生有 毒物質(zhì)殺死細(xì)胞??拐婢苿?duì)預(yù)防和排除真菌污染有效。
這就是細(xì)胞工廠(chǎng)中細(xì)胞或真菌污染的影響及檢測(cè)方法了,隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的不斷進(jìn)步,耗材也會(huì)進(jìn)行更新迭代,更好地滿(mǎn)足市場(chǎng)需求,為科研人員解決各種細(xì)胞培養(yǎng)難題。