我們在培養(yǎng)細胞時最怕出現的情況之一就是細胞培養(yǎng)中出現污染的情況,今天富道細胞來跟大家簡單分享一下細胞工廠污染的幾種表現及補救方法。
1. 細菌污染:細胞工廠中如果出現細菌污染的話,具體情況表現為:細胞工廠在倒置顯微鏡下培養(yǎng)基內有黑色細沙狀,且因為細胞工廠內細胞感染細菌的不同,會出現有不同的外形并導致細胞工廠里面的細胞培養(yǎng)基液體出現渾濁變黃的跡象,會明顯對細胞工廠內細胞生長影響。
如果出現細菌污染情況我們需要對培養(yǎng)細胞所需器皿的滅菌情況進行仔細檢查,在高壓滅菌時放氣時間、壓力是否足足夠,特別是用于儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等細胞培養(yǎng)耗材,如果出現連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染??梢栽谙麓问褂门囵B(yǎng)液前檢查是否內部存在渾濁的現象,并根據此現象添加相應的抗生素處理。
2. 霉菌污染:細胞工廠內如果出現霉菌污染的話具體表現為:內部培養(yǎng)基是清亮的且在倒置顯微鏡觀察下是沒有明顯雜質,在37度恒溫培養(yǎng)箱內培養(yǎng)2-3天,基液依舊清亮,但是內部會有絮狀雜質呈現,且鏡下觀察內部可發(fā)現有細絲狀的團狀漂浮物,有明顯的菌絲現象,雖然細胞工廠內細胞仍可生長,但時間長之后細胞會出現狀態(tài)變差。
那我們可以采用硫酸銅溶液來擦拭CO2培養(yǎng)箱內,后在水盤里也需要加上適度飽和量的硫酸銅。也可以在培養(yǎng)箱中托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。
3. 支原體污染:支原體污染的癥狀為黑色且形狀為多形,細胞工廠內培養(yǎng)基會有渾濁現象,由于血清檢測項目中很少包涵支原體陰性檢測,且支原體是牛血清中最常見的微生物之一并不能采用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。
而出現這種現象可以可以采用獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應。使用時用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
這就是細胞工廠污染的幾種表現及補救方法,富道細胞也希望可以幫到大家。
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