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細(xì)胞培養(yǎng)瓶多用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)到一定程度后，需要將其消化下來(lái)，進(jìn)行下一步的傳代或其他操作。由于是貼壁細(xì)胞，因此消化細(xì)胞時(shí)需要借助消化酶讓細(xì)胞從瓶壁脫落，具體的操作步驟如下：

1、吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

2、加入少量胰酶細(xì)胞消化液，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同）。

3、顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。

4、此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。

以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞的消化步驟，在操作的時(shí)候我們要注意控制好消化時(shí)間，避免因?yàn)橄瘯r(shí)間不足，未達(dá)到相應(yīng)的消化效果；或因?yàn)橄^(guò)度，對(duì)細(xì)胞造成損傷，影響后期的細(xì)胞培養(yǎng)。