細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要特定的環(huán)境,如無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等。細(xì)胞接種存活率是衡量細(xì)胞生存能力的重要細(xì)胞,那么,我們?cè)鯓永?a title="細(xì)胞培養(yǎng)瓶" href="../../pyfp.html" target="_blank" rel="noopener">細(xì)胞培養(yǎng)瓶檢測(cè)這一指標(biāo)呢?
細(xì)胞接種存活率又稱(chēng)細(xì)胞貼壁率。它是細(xì)胞被制成分散的懸液后,以低密度(2~5個(gè)細(xì)胞/cm2)被接種到底物上,貼壁并能存活生長(zhǎng)形成細(xì)胞小群(克隆)的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)值,用以表示細(xì)胞的生存能力和細(xì)胞群的活力。基本步驟如下:
(1)取對(duì)生長(zhǎng)期細(xì)胞,用消化法制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后按檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的接種細(xì)胞的原則,將細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶(濃度相對(duì)高些)。接種12~15瓶。
(2)每2小時(shí)取出一瓶細(xì)胞,倒掉培養(yǎng)液,然后加入胰酶消化已貼壁細(xì)胞,計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,用下面公式逐個(gè)計(jì)算每個(gè)時(shí)間上的貼壁率。每2小時(shí)一次,共觀察24小時(shí)即12。接種存活率%(貼壁率)=(貼壁存活細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))×100%。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶是貼壁類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)常用的容器,細(xì)胞接種存活率僅僅是衡量細(xì)胞生長(zhǎng)狀況的一方面,其他還包括克隆形成率、細(xì)胞分裂指數(shù)等,這些都可以直接反映細(xì)胞的狀態(tài)。