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我們在使用細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細胞時出現的問題，無非是細胞出現污染和細胞本身出現了問題，我們在之前的文章中講述了細胞培養(yǎng)過程出現污染的情況，今天富道細胞來跟大家介紹一下細胞本身的兩個問題和解決辦法。

細胞培養(yǎng)過程中，發(fā)現貼壁細胞表面沾了很多死細胞，傳代過程中一直存在這種情況呢，富道細胞有一招百試百靈，那就是用 PBS 洗兩遍之后，加胰酶進去，晃一晃，迅速將胰酶倒出，再用 PBS 洗一下，再加胰酶正常消化。死細胞由于粘附能力很弱，第一次加胰酶進去以后會掉下來，第二次加胰酶下來的細胞才是活性比較強的細胞。整完一次之后，再次傳代方法同上，一般 2～3 次之后，細胞就完好如初了。

那在細胞培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)時發(fā)現細胞胞質疏松，狀態(tài)不好，根本就養(yǎng)不起來，我們可以從血清下手就行，要么換好血清，要么提高血清濃度，血清濃度提高到 15%～20% 培養(yǎng) 48 h，換成正常 10% 的濃度，用高濃度的血清培養(yǎng)時間過長對細胞有毒性。

我們在對血清下手之后可以同時采取提高細胞密度的方法，可以從我們的細胞培養(yǎng)瓶換到6孔板，12 孔板等，細胞密度大，細胞分泌的細胞因子多，腫瘤細胞通過旁分泌途徑促進細胞生長。

針對細胞胞質疏松富道細胞來跟大家分享一下預防方法：老化的原因在于細胞傳代次數比較多，胰酶消化時間太長，這時候，一定要控制細胞傳代次數，注意胰酶消化時間，胰酶消化時間過長，容易導致細胞狀態(tài)不佳以及胞質疏松。