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細(xì)胞工廠培養(yǎng)技術(shù)在疫苗研制、生物制藥等大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮著重要作用，那么在我們培養(yǎng)細(xì)胞過程中經(jīng)常會(huì)涉及到對(duì)細(xì)胞活力和增殖情況的測定，今天富道細(xì)胞給大家整理了一些細(xì)胞工廠中細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力測定計(jì)數(shù)和活力測定的方法。

先跟大家介紹一些原理：我們培養(yǎng)的細(xì)胞呢在常規(guī)條件是要有一定的密度才能培養(yǎng)的效果比較好，所以我們需要要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。我們的計(jì)數(shù)結(jié)果是每毫升細(xì)胞數(shù)表示。細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法和原理與血細(xì)胞的計(jì)數(shù)是一致的。在我們培養(yǎng)細(xì)胞群體時(shí)總有一些細(xì)胞死于各種原因的，而我們的總細(xì)胞中活細(xì)胞占的百分比被稱做細(xì)胞活力，由組織中分離細(xì)胞一般也要檢查活力，以了解分離的過程對(duì)細(xì)胞是否有損傷作用。復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。

我們用染色細(xì)胞的方法進(jìn)行死細(xì)胞著色，活細(xì)胞不著色，來區(qū)分死細(xì)胞和活細(xì)胞。也可以利用培養(yǎng)細(xì)胞中的某些酶是可以和特定的一些試劑發(fā)生反應(yīng)的，這也是可以測定細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力。

我們可以使用血球計(jì)數(shù)板和蓋片用擦試干凈，將擦拭干凈的蓋片蓋在計(jì)數(shù)板上。將我們的細(xì)胞懸液吸出一些，來滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間。靜置3分鐘。鏡下觀察，計(jì)算計(jì)數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù)，壓線細(xì)胞只計(jì)左側(cè)和上方的。然后按下式計(jì)算：細(xì)胞數(shù)/ml＝4大格細(xì)胞總數(shù)/ 4×10000。

注意：鏡下偶見由兩個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán)，應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算，若細(xì)胞團(tuán)占10％以上，說明分散不好，需重新制備細(xì)胞懸液。