細胞工廠是大規(guī)模貼壁細胞培養(yǎng)經常會用到的一種耗材,主要用于制藥、疫苗生產、細胞治療等領域。那在培養(yǎng)過程中我們我們要實時掌握細胞的生長狀態(tài),根據具體情況做出相關調整??梢酝ㄟ^MTT法對細胞的活性進行檢測,從而確定細胞生長情況。今天富道細胞來跟大家介紹一下細胞工廠中MTT法測細胞相對數(shù)和相對活力。
活細胞中的琥珀酸脫氫酶可使MTT分解產生蘭色結晶狀甲贊顆粒積于細胞內和細胞周圍。其量與細胞數(shù)呈正比,也與細胞活力呈正比。
1、細胞懸液以1000rpm離心10分鐘,棄上清液。
2、沉淀加入0.5-1ml MTT,吹打成懸液。
3、37℃下保溫2小時。
4、加入4—5 ml酸化異丙醇(定容)。打勻。
5、1000 rpm離心,取上清液酶標儀或分光光度計570nm比色,酸化異丙醇調零點。
注意:MTT法只能測定細胞相對數(shù)和相對活力,不能測定細胞絕對數(shù)。
那這是富道細胞為大家分享的如何在細胞工廠中MTT法測細胞相對數(shù)和相對活力的辦法了
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